大连夫妇【大连地区1158对反复流产夫妇的细胞遗传学分析】

大连地区1158对反复流产夫妇的细胞遗传学分析

对有反复流产史的夫妇进行外周血染色体核型分析，有助于诊断和分析其病因， 避免盲目治疗，为其生育提供指导。

一对夫妇发生两次或两次以上的自发性流产称之为反复流产，是妇科常见 疾病，病因复杂。导致反复流产的原因很多，其中染色体异常为重要因素之一。

本院遗传室对1158对反复流产患者进行了染色体核型分析。

1 资料与方法 1.1一般资料 选自2010年1月～2014年7月在大连市妇产医院生殖门 诊就诊的病例，共1158对夫妇，均有两次或两次以上不明原因的自然流产史。流 产次数为2～5次，平均为2.18次，患者年龄为22～45岁，平均31.6岁。

1.2方法 采用RPMI 1640培养基对外周血进行培养72 h，之后加入秋 水仙素继续培养4h;终止培养，按常规收获，G显带。一般每个患者计数15～20 个中期分裂相，挑选3～5个显带较好的核型进行分析，如为嵌合体时，计数50 ～100个分裂相，分析5～10个核型。按ISCN-1995作出诊断结果。计数资料采用 了χ2检验，P0.05为差异有统计学意义。

2 结果 1158对反复流产的夫妇中，共检出异常染色体核型213例，异常率为 9.20%。其中相互易位28例，占异常总数的13.15%;罗伯逊易位10例，占异常总数 的4.70%;倒位5例，占异常总数的2.35%;重复3例，占异常总数的1.41%;数目异常2 例，占异常总数的0.94%;多态性变异165例，占异常总数的77.46%，分析结果见 表1。各种异常(多态)的具体核型，见表2。

1158对夫妇中，有2次自然流产史的983对，异常发生率8.95%;有3次 的145对，异常发生率9.31%;有4次的23对，异常发生率17.39%;有4次以上的7对，异常发生率14.29%，分析结果见表3。各流产次数组的染色体异常发生率间并无 显著性统计学差异。(各组之间行χ2检验，P值均≥0.05) 3 讨论 3.1反复流产患者中染色体异常几率 反复流产夫妇染色体异常频率， 各家报道不一，高者可达12.5%，低者仅0.8%，可能与各自选择的对象、染色体 异常识别的水平以及染色体检查指征的设置有关[1]。本文1158对患者中共检出 异常染色体核型213例，异常率为9.20%，高于Fryns综述中5%～7%[2]的平均值。

3.2染色体异常种类及其与反复流产的关系 3.2.1相互易位 相互易位是反复流产中最主要的染色体异常类型。相 互易位的群体频率约0.195%[3]，本文检出率为1.21%，与许多文献报道相近。在 形成生殖配子的减数分裂过程中，易位染色体将通过同源染色体间的配对形成特 有的四射状体，共可产生18种配子，它们与正常的配子受精后可形成18种合子， 其中仅有一种合子是正常的，一种合子是相互易位携带者，其余16种合子将形成 单体或部分单体，表现为畸胎、死胎、流产等不良妊娠结局[4]。

3.2.2罗伯逊易位 罗伯逊易位是平衡易位的一种特殊形式，本文检出 10例，检出率为0.43%，占异常总数的4.7%。罗式易位携带者与正常人结婚，生 殖细胞减数分裂时可形成6种不同的配子，一种正常染色体，一种为罗式易位染 色体，而其余4种均为异常染色体，表现为流产、死胎及畸形，均无法成活。

3.2.3倒位与重复 倒位是另一种引起流产的重要原因，本文检出30例， 涉及3、10、12和13号染色体。倒位分为臂间和臂内倒位两种，临床上以臂间倒 位多见，本文共检出臂内倒位3例，余下25例均为臂间倒位。倒位发生后，染色 体的结构发生了重排，在减数分裂前期I中，正常染色体与倒位染色体之间会形 成倒位环，这样才能完成同源染色体各同源片段之间的相互配对。在倒位环内， 可形成4种理论上不同的配子：一为倒位染色体，一为正常染色体，另两种为重 组染色体，其带有部分片段的重复及部分片段的缺失，这两种重组染色体各有一 个着丝粒，属于异常的稳定性畸变，可传递给后代。一般来说，发生倒位的片段 越短小，那么其剩下的重复和缺失的部分就越长，它形成得配子和合子能正常发 育的可能性就越小，婚后引起不育、早期流产和死产的比例就越高，分娩出子女 的可能性就相对低。本文发现3例重复核型，均为9号染色体长臂的部分片段重复。

3.2.4数目异常 本文检出1例47，XYY，有研究显示，47，XYY核型变异率为1‰，额外的Y染色体肯定来自父方精子形成过程中第二次减数分裂时 发生Y染色体的不分离。47，XYY男性一般是能生育后代的，但能导致胚胎畸形 而引起流产。

本文有1例患者核型为47，XX，+mar，多了一条额外小标记染色体， 在一定程度上会导致胚胎停育或流产。

3.3染色体多态性变异与反复流产的关系 3.3.1大Y 大Y指Y≥18号染色体。本文检出大Y核型26例。Y染色体长 度的变异是其长臂(Yq)远段的结构异染色质部分长度差异造成，该区主要成分是 Y染色体特有的串联重复序列DNA，此DNA序列的重复复制、缺失、易位或螺旋 化程度的改变均可引起长度的变异。有研究表明，有反复流产史的女性，其配偶 大Y发生率明显高于正常人群[5]。有文章指出，大Y中的DNA重复序列可能会使 合子在早期细胞分裂时得有丝分裂发生错误，或者影响与相关基因的调节及细胞 的分化。

3.3.2小Y 小Y指Y≤21号染色体。本文检出小Y核型40例。有学者推测 小Y染色体多态性变异的机制有以下3种可能：①由于Y染色体过分紧密排列可影 响基因转录，从而导致基因功能不能正常发挥;②异染色质的部分或完全丢失， 而引起常染色质排列松散，导致基因功能丧失;③由于Y染色体发生了部分丢失， 造成基因功能不能发挥。

3.3.3 9号染色体臂间倒位 有报道称9号臂间倒位在人群中的发生率 高达1%[4]，属于染色体多态性变异，本文检出25例9号染色体臂间倒位核型。

inv(9)的作用一直就有争议，有学者认为它没有遗传物质的丢失，不影响患者的 表型，与不育、流产、死胎无关。但多数学者认为其并非是一种正常的多态现象， 与临床症状有一定相关性，并产生一定的遗传效应[6]。

3.3.4次缢痕增大 次缢痕主要存在于第1、9和16号染色体。次缢痕的 增长是高度重复的DNA序列增加所致，本文检出24例次缢痕增大的患者，由于 高度重复的DNA序列增加，影响了细胞分裂，造成同源染色体配对的困难，可 能会产生不平衡的配子，形成非整倍体的子代而发生流产或不平衡的配子不能受 精而死亡造成不孕不育。

3.3.5随体增大 D、G组染色体短臂多态同样可引起一定比率的自然流产和胚胎死亡。本文检出随体增大的核型50例，其机制可能就是细胞分裂的同源 染色体配对时，染色体多态部分造成同源染色体配对困难，从而影响细胞分裂而 导致胚胎发育障碍，导致流产、胚胎死亡或子女染色体异常。

3.4反复流产次数与染色体异常检出率的关系 有学者提出，多次的连 续性流产可能是由于母体本身的持久因素(如免疫因素、解剖因素等)，并不是由 于染色体重排的缘故。由此可见，流产次数与发现异常核型的几率之间似无关联。

综上所述，染色体异常是引起反复流产的重要原因之一，对不明原因 的流产夫妇进行染色体检查，不仅是病因诊断的需要，而且对检出的携带者指导 生育，进行产前诊断，以避免染色体异常患儿出生，从而达到优生的目的。

作者：张雪瑞 裘娟 刘群 邵小光 来源：医学信息 2015年5期