【84例慢性淋巴细胞白血病遗传学异常及预后分析】 慢性淋巴细胞白血病

84例慢性淋巴细胞白血病遗传学异常及预后分析

本研究探讨CLL患者遗传学异常与其他预后指标的相关性及预后价值。

1资料与方法 1.1研究对象 2009年2月~2011年8月北京协和医院住院患者均进行了荧光原位杂交 （fluorescenceinsituhybridization，FISH)检测。5种探针：CSP12(12p11.1~12q11.1)、 D13S25(13q14.3)、ATM(11q22.3)、RBl(13q14)及P53(17p13.1)(北京金菩嘉公司）。

按照说明书流程操作，每例患者至少计数200个细胞。阈值采用10例健康人外周 血均值+标准差x3。

1.3研究方法 回顾性分析84例患者的临床资料，包括：CLL的临床Binet分期及实验 室检查，乳酸脱氢酶、CD38结果。

1.4统计学分析 和门诊收治的84例CLL患者，所有病例诊断均符使用SPSS17.0统计软 件，比较用卡方检验计算概率值，生存分析采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线和 Log^rank检验进行生存率的比较。

2结果 2.1患者资料 男性56例，女性28例，男：女比为2.0:1,年龄36~88岁，中位年龄61岁。

51例有详细病历资料可以进行Binet分期，Binet分期以C期患者为主。所有的患者均进行了FISH检测，有62例患者至少有1种遗传学异常。62例患者进行了CD38 检测,17例阳性。62例患者进行了LDH检测，其中13例LDH增高（表1)。

2.2FISH结果 遗传学异常的种类包括:13q-(包括RB1缺失或/和D13S25缺失），P53 基因缺失，-12,ATM缺失，+12(图1)。

84例患者中有62例（73.8%)至少有1种遗传学异常：有1例（1.2%)患 者同时有4种遗传学异常（13q-、P53基因缺失,ATM缺失，-12共存），有8例（9.5%) 同时有3种遗传学异常（13q-,P53基因缺失,ATM缺失，-124种缺失中有3种），有 19例（22.6%)同时有2种遗传学异常，有34例(40.4%)有1种遗传学异常。遗传学 异常最常见的为13q-,占56%,其中包括3种形式:D13S25缺失19%,RB1缺失3.6%,二 者共缺失33.3%;其他依次为P53基因缺失（28.6%),-12(16.7%),ATM缺失 （13.1%),+12(13.1%)。各种遗传学异常或单独存在,或合并其他异常（表2)。

2.3比较不同的遗传学异常与性别、年龄、Binet分期、LDH是否增高、 CD38是否表达的关系 Binet分期、LDH水平及CD38表达进行比较，发现在60岁年龄患者里， +12阳性率显著高于60岁患者（24%vs3%，P0.05)，未发现其他相关性(表3)。

2.4CD38表达与性别、年龄、Binet分期、LDH的关系 CD38表达与性别、年龄、Binet分期、LDH是否增高进行比较,发现 CD38表达与否与LDH水平是否增高相关,在LDH增高组中，CD38表达阳性的病 例比例增高（67%vs20%，P0.05),而与性别、年龄分组、Binet分期无关。

2.5随访 对53例有联系方式的患者进行了电话随访,随访至2011年9月，中位随 访时间26(1~150)个月。5例患者因疾病进展于发病后1、3、7、16和56个月死亡， 其中1例患者死于CLL继发的难以控制的自身免疫性贫血，另外4例患者死于原发 病进展。5例患者中3例患者具有del(17p13)或del(11q22)异常或复杂异常（定义为 两种或两种以上遗传学异常）。其中9例单纯del(13q14)异常中，无1例患者死亡。

生存分析结果显示,各预后相关因素中，年龄（60岁vs60岁）、Binet分期、CD38与生存期无明显相关性（P0.05)。各遗传学异常中，伴有del(17p13)或del(11q22) 或复杂异常预计中位生存时间为75个月，单纯具有del(13q14)异常组的预 计中位生存时间为150个月，其他患者预计中位生的CLL患者的遗传 学异常阳性率在64%~82%，存时间为120月（图2)mc3umaectr01llsdel；
13q14)最 常见，而del(17p3)、+12和del 3讨论 CLL作为一种预后异质性很强的疾病，评价预后指标众多,而越来越 多的研究表明遗传学异常具有重要的判断预后的价值。但常规染色体显带技术仅 20%的人可检测到克隆性遗传学异常，随着间期FISH在CLL细胞遗传学研究中的 应用，超过80%的CLL患者可检测到基因组异常，大大提高了CLL的基因异常检 出率H。

国内外多数研究发现,通过FISH技术检测(11q22)不同研究比例略有不 同。本研究中结果同以往的研究类似,但新发现12号染色体缺失。本研究12号染 色体缺失信号比例平均为10.23%(7%~22%),经过多人多次复核，明显高于我院12 号染色体缺失的阈值6.02%,排除了假阳性的可能。虽然从年龄分组、性别、Binet 分期、LDH水平以及CD38表达未发现中12号染色体缺失CLL患者有何特殊之处, 但由于随访时间及患者数有限,其临床及预后意义有待于观察或其他研究进一步 证实。

以往的研究显示具有+12遗传学异常更容易出现不典型的形态，容易 向幼淋细胞白血病转化，表达更强的SmIg与FMC7,预后更差，Binet分期也更晚, 容易在B或C期。本研究发现+12遗传学异常在60岁年龄组中更易出现,但是没有 发现与Binet分期的相关性，原因可能与标本例数偏少有关。

各种遗传学异常对预后的影响各不相同。伴del(13q14)3异常的患者中 位生存期133个月，无治疗生存期长达92个月。另一项研究发现伴有其他易位的 患者中位无治疗生存期明显短于单纯del(13q14)患者。而伴P53基因（17p13)缺失 CLL患者,病程进展快、瘤细胞负荷高、多处于疾病晚期生存期短M-11。ATM基 因位于染色体11q22,伴有ATM基因缺失的CLL患者发病年龄较年轻，_般55岁， 且病程常表现为侵袭性，预后差，提示del(11q22)可作为疾病进展的一个早期指 标。本研究同样发现，单纯del(13q14)的中位生存期最长,而伴有del(17p13)或del(11q22)或复杂异常中位生存时间最短,但未达统计学差异,这可能与本研究随 访样本量以及随访时间不够有关，可进一步加长随访时间。

CD38的表达作为慢性淋巴细胞白血病患者独立的预后因素逐渐引起 人们的重视。有研究14发现CD38表达水平与IgV(H)的突变密切相关，CD38+的 患者预后更差。另一项研究a5]发现CD38+患者无进展生存期（PFS)较CD38-者明 显缩短,5年PFS分别为37%与75%。CD38还是疾病侵袭性的一个重要标志,无论患 者的临床分期如何,即使处于Rai分期的0期，CD38+患者亦常具有明显的侵袭性。

本研究发现LDH增高的患者中表达⑶38的比例更高，而LDH在CLL中与肿瘤负荷 密切相关,这同样提示CD38表达为预后不良指标,今后在临床工作中也需要引起 我们重视。