1 材料与方法 1.1 标本收集 于2002年夏季采集蚊标本的同时,采集正常人群血标本,静脉采血, 分离血清,-20℃保存备检。采集地点为涉县各乡村。
1.2 检测指标 盖塔病毒igm和igg抗体。
1.3 检测方法 1.3.1 igm抗体检测:采用抗体捕捉elisa方法检测igm抗体。
wwW.133229.cOm包被抗人igmμ链,4℃过夜,封闭,加稀释待检血清,37℃温 育,洗涤后加单克隆抗体酶标结合物,37℃温育,洗涤后37℃避光显色。包被液 为碳酸钠和碳酸氢钠缓冲液,洗涤液为0.5% tween生理盐水,底物缓冲液为柠檬 酸、碳酸氢钠缓冲液,封闭液为10%胎牛血清的洗涤液,终止液为2m硫酸,底物 为h2o2和邻苯二胺,490 nm测定od值,判定标准为待检血清od值与阴性血清od 值之比≥2.1为阳性,阴性血清孔od值不足0.05时按0.05计算。1.3.2 igg抗体检测:采用间接elisa方法检测盖塔病毒igg抗体。检测步 骤包括包被抗原,4℃过夜,洗涤后加待检血清,37℃温育,洗涤后加酶标抗人 igg抗体,37℃温育,洗涤后37℃显色。包被液、底物缓冲液、终止液、底物及 检测条件和结果判定标准均与igm抗体相同。
1.3.3 病毒抗原:以在涉县分离到的盖塔病毒感染细胞制备病毒全抗 原。
2 结果 2.1 血清标本采集 采血时间为2002年7、8、9月,采血数量为300份,男女比例为137∶163。
2.2 血标本年龄分布 采血对象年龄范围为1~30岁,分为6个年龄组,1岁~,5岁~,10 岁~,15岁~,20岁~,25~30岁。
2.3 采血对象地区分布 采血对象分布于涉县3个乡镇的4个村,在这4个村分别采集102份、89 份、84份和25份血清,其中分离到盖塔病毒的2个乡镇分别采集114份和84份血清。
2.4 检测结果 经实验室检测,300份血清中只有1份igm抗体阳性,od值为0.185,阳 性率为0.30%,该血清分布在25~30岁年龄组;300份血清中有49份血清igg抗体阳 性,阳性率为16.30%,igg抗体阳性血清也分布在大年龄组。
3 讨论 检测结果显示,在河北省涉县盖塔病毒循环地区,30岁以下人群盖塔 病毒总感染率为16.67%(50/300),在自然界循环中,盖塔病毒不仅感染人而且感 染率还比较高,盖塔病毒感染人类主要在大年龄组人群。但盖塔病毒感染人类后 是否引起发病,临床表现如何,30岁以上人群感染率多大,或总人群感染率多大, 有待进一步研究。由于以往的研究表明,甲病毒的分离主要出现在南方和新疆等地,这 次在我国北方地区分离到盖塔病毒并发现感染人类,而且感染率如此之高具有重 要的流行病学意义,为进一步研究盖塔病毒的流行病学奠定了基础和提供了宝贵 的资料。
以往海南和广东11个地区盖塔病毒血清抗体检测结果表明,广东省未 发现盖塔病毒抗体阳性者;海南省的6个地区中只有琼中地区发现有盖塔病毒抗 体阳性,阳性率分别为1.95%和2.37%[6,7]。然而,此次对河北省涉县人群盖塔 病毒感染率调查中,正常人群的总感染率为16.67%,显著高于海南琼中地区的感 染率,结果具有重要的流行病学意义。
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